1 发病情况
1997年以来,某市陆续有猪场出现怀孕母猪繁殖障碍和仔猪呼吸症状,受危害母猪5000余头,仔猪4400余窝,约有26000余头仔猪或胎儿死亡。多为引进种猪后2-3 天开始,发热猪逐日增多,60%的病猪皮下有出血,并迅速蔓延至其它猪群,病猪表现为发热、皮肤发红、呼吸加快、流产、产死胎或木乃伊胎,哺乳仔猪和断奶仔猪继发感染增多,仔猪窝死亡率在20%—100%不等。
2 临床症状
患猪体温急剧升至41℃左右,食欲不振或废绝。
肥育猪多数皮肤发红,近一半的病猪呼吸加快,咳嗽者增多,极少数病猪耳部变蓝紫色。若无继发感染则极少死亡。
母猪主要表现为大量怀孕母猪流产,尤以怀孕后期的母猪流产更为严重,产死胎、木乃伊胎的母猪增多,有的流产胎儿已变软分解。即使产下活仔猪,也多为弱仔,成活率极低。常出现早产或延迟分娩,哺乳母猪少奶或无奶,致使仔猪大批饿死。
仔猪发热及呼吸症状明显。哺乳期的仔猪发病率和死亡串最高,常见母猪发热后仔猪接着发热,常常整窝死亡。断乳后的仔猪皮肤发红不太明显,但可见双耳变成紫色,常消瘦衰竭而亡。极少数病仔猪出现咳嗽、流鼻涕。
3 剖检变化
比较常见的变化是弥漫性间质性肺炎,间质增生,肺泡缩小;多数患猪实质脏器肿大,表面有点状出血;肠道呈卡他性炎症或卡他性出血性炎症,肠壁变薄;全身淋巴结肿大,心包积液;子宫内膜发炎,腹腔积液等,
4 微生物学诊断
无菌采集死亡不久的胎儿、仔猪或濒死仔猪肝、脾、肺、心、肾、淋巴结、脑等内脏组织[4],剪碎,按1:10加入DMEM制成悬液,并加双抗(2 000 U/mL),冻融3次,4 000r/min离心20min,取上清液—40℃保存即为病料毒。
取病料1.0 mL接种于Marc—145细胞(培养液为DMEM+犊牛血清20 mL+双抗),盲传4代后,无明显的CPE。传至第5代时可见轻微的CPE出现,至第6代开始出现CPE,第7代的CPE较典型,细胞变圆、皱缩、脱落。
取典型病变细胞,涂片,干燥,冷丙酮固定。分别滴加LV毒株和ATCC VR-2332毒株阳性血清,37℃感作60 min,PBS(0.01 mol/L,pH7.2)液洗涤,滴加荧光标记的兔抗猪lgG,37℃感作60 min,PBS液洗涤,碱性甘油封片,在荧光显微镜下观察,可见ATCC VR4332毒株阳性血清产生的荧光明显强于LV毒株阳性血清产生的荧光。
5 防制
5.1 组织灭活苗的制备
5.1.1 毒液灭活
无菌采集PRRSV阳性濒死仔猪肺、脾、淋巴结等,剪碎,加适量PBS液于高速捣碎机中匀浆,加PBS液稀释成1:10混悬液,冻融3次,3 000r/min离心,取上清液加入0.2%甲醛溶液37℃灭活24 h,期间振荡数次,无菌检查合格后即为制苗病毒液,40℃保存备用。
5 1.1 蜂胶纯化
蜂胶1份剪碎,加入4份95%乙醇溶解,25℃作用24 h,冷却离心取上清液,以干物质计算配制成30 mg/mL溶液,4 ℃保存备用。
5.1.3 疫苗制备
蜂胶乙醇溶液与甲醛灭活的病毒液等体积混合,低速拌匀成为混悬液。无芮检查合格即为PRRS蜂胶佐剂组织灭活苗。
5.1.4 安全试验
未免疫蓝耳病疫苗的母猪所产1日龄健康仔猪4头,接种研制的组织灭活苗5 mL/头,观察2周全部健活;同时分别接种怀孕80天、85天、90天健康母猪3头,无流产现象,足月分娩无死胎、木乃伊胎及弱仔。
5.2 防制措施
5.2.1 受蓝耳病威胁猪场的防制措施
①临近猪场有蓝耳病疫情,受威胁猪场种猪要接种蓝耳病组织灭活苗,按4~6mL/头注射。
②饲料中添加霉菌毒素处理剂如“霉消安”等,消除霉菌毒素的危害,提高动物机体对疫苗的应答能力,另外,饲料中添加含有免疫增强剂的“加康”(按0.4%添加)和多种维生素,连续饲喂2周,以增强体质,减少应激,促进抗体生成和防制继发性感染。正气内守、邪不可干,防患于未然。
③做好猪场消毒工作。
④注重科学管理,加强囤舍内外消毒,尽量减少猪群的应激反应,避免从正发生蓝耳病猪场引进种猪。
5.2.2 首次暴发蓝耳病猪场的防制措施
①蓝耳病组织灭活苗紧急预防注射,种猪6 mL/头,育肥猪4 mL/头,保育猪3~4 mL/头,新生仔猪超前免疫2 mL/头。
②仔猪断奶前后和50日龄时,分别在饲料或饮水中添加电解质多维,连用7天,以减轻应激,提高机体抗病能力。
③防制继发感染。发生蓝耳病的猪场,由于猪免疫功能下降,容易发生继发感染,常见的有猪瘟、大肠杆菌病、嗜血杆菌病、沙门氏菌病和链球菌病等。主要危害产房仔猪、保育猪和生长猪。
④加强消毒。要尽量减少猪舍内外蓝耳病病毒的浓度。由于蓝耳病病毒对消毒剂的抵抗力不强,因此常用的消毒剂即可将其杀灭。猪舍内消毒一般选用刺激性较小的药物,如定期轮换使用复合醛、碘制剂等;舍外选用氯制剂、过氧乙酸、甲醛,尤其主要对粪沟、粪场、解剖和掩埋病死仔猪的场地等进行消毒。发病舍门口设消毒池或消毒盆,饲养员和技术员进出猪舍时必须沾湿胶鞋和洗手,严禁无关外人进入。
⑤果断淘汰。在哺乳期间发病的仔猪,因其抗病力较弱,治愈率常常很低,且其不断向外排毒,所以从防制传染病的角度和经济效益考虑,应及时将其淘汰处理。这样既可以节约治疗费用,又可减少其他仔猪感染的机会。据我们观察,以下2种仔猪,一般无治疗价值,可作为淘汰处理对象:一种是早产或延期分娩、体重小于0.55 kg、不会吮乳、四肢外张、衰弱无力、喘气、毛粗乱、精神不好或出现神经症状的仔猪;另一种是紫耳、紫尾、会阴部及后躯皮肤有出血点,或股内侧及腹部皮下有出血点,眼睑粘连、精神不好、食欲锐减的仔猪暂停剪牙、断尾、去势等,尽量减少应激。
5 2.3 慢性感染期间的防制措施
急性暴发期过后,PRRS猪群即转入慢性感染期。染期的防制措施如下。
①蓝耳病组织灭活苗接种。种猪6 mL/头,每次间隔5—6个月;仔猪超前免疫2 mL/头,35日龄时强化免疫3 mL/头;后备猪于配种前接种6 mL/头;怀孕至60-70 天时,强化免疫6mL/头。
②仔猪转栏前后3 天,在饮水中添加抗应激工物,如电解质多维等。
③将仔猪去势时间提前到7~10日龄,注射用针头要做到1头猪用1个针头,防止人为感染。
④落实场内全进全出制。经观察,落实场内全进全出的方法虽然不能终止PRRSV的传播,但却有助于控制继发感染,提高经济效益。具体做法是:根据母猪群的大小、周产窝数和周转栏头数,将原来的大产房和大保育舍,改建成以周为单位的“小产房”和“小保育舍”。在进猪之前对猪舍及圈栏进行彻底清洗、晾干、甲醛熏蒸消毒。栏舍较为宽松的场,最好在消毒后空置1-2周再进猪。
⑤仔猪一旦出现毛粗乱、皮肤发白、体表油脂增多、精神不振等初期感染症状时,应立即肌注维生素E 100~150 mg;维生素K3 l~3 mL;内服腾骏“抗疫键”20mg/kg,每天1次,连用3天;并须加强保暖及护理,饲料中添加“加康”、“支原净”、替米考星等效果较好的抗生素、饮用添加抗生素的口服补液盐,以增强体质,实践证明,具有明显的防治效果。
5.2.4 加强PRRS发生期间其他疫病的监控
PRRS发生期间,易继发其他疫病,特别是要加强猪瘟、副伤寒、伪狂犬病等烈性传染病的监控和免疫。生产实践中,一旦发现猪群中猪瘟强毒、沙门氏菌或有伪狂犬病发生的迹象,我们建议采用如下新的免疫程序:
①猪瘟免疫:新生仔猪实行超前免疫,仔猪在出生后未吃初乳前注射猪瘟弱毒苗300个免疫剂量,1.5 h后再让其吃初乳。30~35日龄强化免疫600-900个免疫剂量。
②后备母猪75 kg时,注射600-900个免疫剂量。
③经产母猪于仔猪断奶前后注射600-900个免疫剂量。
④公猪每年4、9月份各注射600~900个免疫剂量。
⑤副伤寒免疫:7~10日龄首免1头份;20~25日龄加强免疫1.5头份。
⑥伪狂犬病免疫:母猪于配种前和分娩前30日灭活苗4 mL。
⑦种公猪每头4mL,每年2次。
⑧仔猪3~5日龄首免1 mL,若仍有少数仔猪发病可以在20日龄强化免疫2mL。
⑨链球菌病免疫:用链球菌弱毒苗于仔猪10~12日龄首免1头份,若免疫效果不完全,可在25-30日龄强化免疫2头份。也可采用本场链球菌灭活苗免疫。
⑩大肠杆菌病免疫:用本场致病性大肠杆菌灭活苗于母猪分娩前30天一次注射4~6 mL。
6.讨论
PRRS可引起猪免疫抑制,常常引起继发感染,使损失加重。我们在临床实践中也发现,凡是有PRRS的猪场,极易出现猪瘟、伪狂犬病、副伤寒、链球菌病等的继发感染。
疫苗的使用,不少人认为弱毒活苗存在安全问题,而灭活苗的效果又有不确定性。临床中,从我们使用组织灭活苗的情况看,保护效果是可以信赖的。
传统医学认为“正气内守,邪不可干”。蓝耳病病毒之所以能侵入猪体内,是其机体虚弱和抗病力不强的表现,故提高猪体的抗病力相当重要。可应用含有金丝桃素等中药成份的制剂,如“安泰”等抗菌、抗病毒中西药制剂,试用于蓝耳病的防制,具有一定的抗感染、促进抗体生成和增强动物机体抵抗力的功效。
首次暴发蓝耳病的猪场,损失最大的产房仔猪,死亡率可高达30-80%左右,其次是保育猪,死亡率达30%-50%;急性期过后,由于病愈母猪体内产生抗体或注射PRRS组织灭活苗后产生抗体,哺乳仔猪可由母乳中获得抗体,因此产房仔猪成活率逐渐回升,但50日龄的保育猪体内抗体水平有所下降,不能抵御强毒的攻击,造成零星发生和散毒,实践中,及时淘汰病弱仔猪,会大大降低经济损失。
参考文献:
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